HE染色操作步骤

苏木精 — 伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ，简称HE染色法 ，石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱性 ，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色 ；伊红为酸性染料 ，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。下面介绍。

材料/工具

甲醛二甲苯酒精苏木精水溶液，酒精伊红染

方法

取材，固定：固定液——甲醛（）
从人或动物新鲜尸体上取下组织块(一般厚度不超过0．5厘米)投入预先配好的固定液中(10％，Bouin氏固定液等)使组织、细胞的蛋白质变性凝固，以防止细胞死后的自溶或细菌的分解，从而保持细胞本来的形态结构。

修剪，脱水，透明：脱水剂——酒精透明剂——二甲苯
不同组织固定时间不同，固定成功后需要修剪25px*25px*5px，放入包埋盒中，流水冲洗（去除组织中的固定液）30分钟。至于不同浓度的酒精脱水，一般用由低浓度到高浓度酒精作脱水剂，逐渐脱去组织块中的水份。再将组织块置于既溶于酒精，又溶于石蜡的透明剂二甲苯中透明，以二甲苯替换出组织块的中酒精，才能浸蜡包埋。

浸蜡，包埋：石蜡
将已透明的组织块置于已溶化的石蜡中，放入溶蜡箱保温。待石蜡完全浸入组织块后进行包埋，冷却凝固成块即成。包埋好的组织块变硬，才能在切片机上切成很薄的切片。

切片、展片、烤片：
将包埋好的蜡块固定于切片机上，切成薄片，一般为5—8微米厚。切下的薄片往往皱折，要放到加热的水中烫平，再贴到载玻片上，放45℃恒温箱中烘干。

脱蜡、至水、染色：脱蜡剂：二甲苯至水剂：酒精 染色剂：苏木精水溶液，酒精伊红染